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发酵豆粕各项指标检测方法与标准
来源: | 作者:xapulong | 发布时间: 2022-12-15 | 2138 次浏览 | 分享到:

发酵豆粕各项指标检测方法与标准

1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。 

2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。 

3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。 

4、可溶蛋白的测定方法 

5、小肽含量的测定           

水份的测定  水份测定直接参见国标 测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量,其数值为A,并计算有机酸的挥发量。 水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量,否则会出现水分超标现象。           

总有机酸检测  试剂:NaOH标准溶液(邻苯二甲酸氢钾标定),酚酞指示剂 仪器:磁力搅拌器 离心机 方法: (1)取发酵后鲜样品15g 置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水,在磁力搅拌器上浸提30min。 (2)取部分浸提样离心10min(3000r/min)。 (3)取上清液15ml, 加30ml去离子水稀释(以消除底色的影响),加酚酞指示剂四滴,用0.1molNaOH标准溶液滴定,并记录到终点消耗NaOH体积。(终点到溶液呈现粉红) 计算 乳酸(%)=N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度; V(NaOH) :消耗NaOH标准溶液体积; 0.09008:乳酸的毫克当量。 0.1mol氢氧化钠的配制与标定  1、配制:称取9.6g氢氧化钠,溶于100ml水中,摇匀,注入聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液,注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却),摇匀。 2、标定 称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾,准确至0.0001g,溶于50ml的无二氧化碳水中,加4滴酚酞指示剂(0.1%),用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色,同时作空白试验。 3、计算 氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算 c(NaOH)=m/(V1-V2)×0.2042 式中          c(NaOH)——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度,mol/l;                   V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量,ml;                    V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量,ml;                    m——邻苯二甲氢钾之质量,g;         0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c(NaOH)=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。 0.1%酚酞指示剂的配制:称取1.000克酚酞,溶解与100ml95%的试剂酒精中,混匀。

乳酸测定 称取样品10g与50ml的烧杯中,移取30ml去离子水,在磁力搅拌器上搅拌30min,在3000r/min离心10min,取上清液利用气相色谱或液相色谱测定乳酸含量。            

pH的测定 称取样品10g与50ml的烧杯中,移取15ml去离子水,搅拌30min,用 pHS-3C型pH计测定溶液的pH值。或者用精密pH试纸测试。          

可溶性蛋白的测定  根据AOCSBa11-65测定蛋白质溶解指数的方法 称取20g样品于300ml的匀浆杯中、量取50ml 37+1℃的去离子水于匀浆杯中,将匀浆杯放在37℃的水浴中,浸泡搅拌5min,在内切式组织匀浆机上匀浆10min,从匀浆杯中取出浆液移入600ml烧杯中,待浆液分层后,移出40ml上清液注入50ml离心管中,并在2700r/min的转速下离心10min,移取15ml上清液于凯氏烧瓶中,测定上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量,计算溶解可溶性蛋白质的数量。           

小肽含量测定方法 三氯乙酸(TCA)法 三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白质在TCA溶液中沉淀,除去酸不溶蛋白质,然后测定酸溶蛋白含量。国外大量资料表明在蛋白质酶水解的研究中测定水解度,通常在酶解液中加入TCA溶液,是为水解的大分子蛋白质沉淀,而与小分子的酸溶蛋白成分,即肽类和FAA离开,测定酸溶蛋白占总蛋白的含量,求得水解度,即酸溶蛋白占总蛋白的百分比。 

粗蛋白≥50%      小肽(1000d以下)≥10% 乳酸≥3.5%       水分≤10% 钙 0.5-0.54%    总磷≥0.74% /gm益生菌≥20亿/克   蛋白酶≥150 粗脂肪≤5.0%     粗纤维≤3.0% 无氮浸出物≤28%  粗灰分≤6.0% 猪消化能(kcal/kg)3980 猪代谢能(kcal/kg)3600 猪净能(kcal/kg)2320 禽代谢能(kcal/kg)2570 鱼消化能(kcal/kg)3200 奶牛净能(kcal/kg)1090  项目         含量 天门冬氨酸Asp   5.42% 赖氨酸Lys        3.03% 蛋氨酸Met        0.65% 苏氨酸Thr        2.05% 精氨酸Arg        3.50% 甘氨酸Gly        2.25% 丝氨酸Ser        2.43% 异亮氨酸Ile        2.21%

苯丙氨酸Phe        2.37% 缬氨酸Val        2.36% 组氨酸His        1.24% 谷氨酸Glu        9.84% 丙氨酸Ala        2.30% 脯氨酸Pro        2.04% 色氨酸Trp        0.50% 亮氨酸Leu     3.76%